Revista de Investigación y Desarrollo Acuícola

Abstracto

Identificación y utilización eficiente de antibióticos para el desarrollo de un sistema de transformación estable en Porphyra yezoensis (Bangiales, Rhodophyta)

Megumu Takahashi, Koji Mikami, Hiroyuki Mizuta y Naotsune Saga

A pesar del desarrollo de la expresión génica transitoria en las especies de algas rojas Porphyra, aún no se ha establecido un sistema de transformación estable en estas algas. Una razón para la dificultad en la transformación es la falta de una manera de seleccionar células transformadas de las algas. Por lo tanto, para identificar antibióticos adecuados para la selección de células transformadas de manera estable, probamos el gametofito para la sensibilidad a 6 antibióticos, ampicilina (Am), kanamicina (Km), higromicina (Hm), genericina (G418), cloranfenicol (Cm) y paromomicina (Pm), que se emplean frecuentemente como agentes de selección en la transformación de plantas terrestres y microalgas. Las pruebas de sensibilidad, que se llevaron a cabo con diferentes concentraciones (0-10 mg mL-1) de antibióticos, mostraron que Hm, G418, Cm y Pm exhibieron un efecto letal a más de 1,0 mg mL-1, lo que sugiere la idoneidad de estos cuatro antibióticos para la selección de células transformadas genéticamente a partir de gametofitos de P. yezoensis, mientras que los gametofitos de P. yezoensis fueron altamente resistentes a Am y Km. También logramos reducir las concentraciones de antibióticos disminuyendo el valor de pH y la concentración de sal utilizando un medio sintético artificial. Aumentar la sensibilidad de las células gametofíticas a Hm, G418, Cm y Pm en el medio sintético modificado contribuirá a establecer un sistema de transformación genética en P. yezoensis.