Revista de Patología Vegetal y Microbiología

Abstracto

Amplificación isotérmica mediada por bucle de inmunocaptura para la detección rápida del virus del enrollamiento amarillo de las hojas del tomate (TYLCV) sin extracción de ADN

Mohammad Amin Almasi, Seyedmohammad Hosseyni Dehabadi y Zahra Eftekhari

Para reducir al mínimo el tiempo necesario para algunos ensayos de diagnóstico, como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP; debido principalmente al paso de extracción de ADN) y también DAS-ELISA, se utilizó y optimizó un protocolo innovador de inmunocaptura LAMP (IC–LAMP) y PCR de inmunocaptura (IC-PCR) basado en el genoma del virus del enrollamiento de la hoja amarilla del tomate (TYLCV). Aunque los ensayos DAS-ELISA, IC-PCR e IC–LAMP pudieron detectar con éxito muestras de plantas infectadas positivas, considerando el tiempo, la seguridad, la sensibilidad, el costo, la falta de necesidad de extracción de ADN y la simplicidad, el último fue en general superior. El azul de hidroxinaftol pudo producir un cambio de color y un brillo estables y prolongados en un enfoque basado en tubos cerrados para evitar el riesgo de contaminación cruzada. En conjunto, como IC–LAMP es sensible, rentable, bastante fácil de usar y también puede generar resultados más precisos que los procedimientos de diagnóstico anteriores, proponemos este ensayo como un sistema de reconocimiento viral alternativo altamente confiable con respecto al reconocimiento de TYLCV y probablemente otras enfermedades de base viral.