Revista de Investigación y Terapéutica Biomolecular

Abstracto

Caracterización inmunoquímica de la secuencia específica de la proteína URG7

Ostuni A, Cuviello F, Salvia AM, D'Auria F, Statuto T, Di Nardoc E, Miglionico R, Carrettad V, Musto P y Bisaccia F

URG7 es una proteína antiapoptótica que consta de 99 residuos de aminoácidos regulados positivamente por el antígeno x durante la infección por VHB. Los primeros 74 aminoácidos son idénticos a los de la proteína 6 de resistencia a múltiples fármacos (MRP6), mientras que los residuos de aminoácidos del 75 al 99 son específicos de la proteína URG7. Se utilizaron herramientas inmunoinformáticas y análisis de estructura secundaria para identificar las propiedades antigénicas de esta secuencia URG7. El péptido 75-99 se sintetizó mediante el método de fase sólida, se caracterizó estructuralmente mediante espectroscopia de CD y se conjugó con un transportador proteico. Se inmunizaron conejos blancos de Nueva Zelanda y se analizaron los sueros para detectar anticuerpos específicos antipéptidos mediante ELISA y análisis de transferencia Western. Finalmente, se realizó una prueba ELISA con sueros humanos.

Los conejos inmunizados con el péptido 75-99 producen anticuerpos que reconocen tanto el péptido 75-99 como el polipéptido recombinante URG7. Además, ambos antígenos permitieron la detección de los anticuerpos anti-URG7 en sueros de sujetos sanos e infectados por el VHB, aunque con un umbral discriminante diferente. Nuestros datos sugieren que el ensayo ELISA de péptidos contra la secuencia específica de la proteína URG7 permite una buena sensibilidad y especificidad para la detección de anticuerpos anti-URG7 en sueros de pacientes infectados por el VHB.