Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Focalización mejorada y retención mejorada de células madre pluripotentes inducidas, derivadas de fibroblastos, autólogas y humanas en los sarcómeros del miocardio infartado con la ayuda de anticuerpos tetravalentes heteroespecíficos de bioingeniería

Marek Malecki

Los ensayos clínicos para regenerar el corazón humano lesionado por un infarto de miocardio implican la administración de células madre al lugar de la lesión. Sin embargo, sólo una pequeña fracción de las células madre introducidas se detectan en el lugar de la lesión, tan sólo dos semanas después de esta intervención terapéutica. Esto dificulta significativamente la eficacia de la terapia con células madre. Para resolver el problema mencionado anteriormente, hemos diseñado mediante bioingeniería genética y molecular anticuerpos tetravalentes heteroespecíficos (htAbs), que tienen una especificidad exquisita y una alta afinidad hacia las células madre humanas pluripotentes a través de los dominios de los htAbs que se unen a SSEA-4, SSEA-3, TRA-1-60 y TRA-1-81, así como hacia el músculo cardíaco lesionado a través de los dominios de los htAbs que se unen a la miosina cardíaca humana, la α-actinina, la actina y la titina. El tejido cardíaco se obtuvo de los pacientes, que estaban recibiendo trasplantes de corazón. Las células madre pluripotentes inducidas humanas autólogas (hiPSC) se generaron a partir de fibroblastos de los pacientes mediante administración no viral y expresión transitoria de las construcciones de ADN para: Oct4, Nanog, Sox2, Lin28, Klf4, c-Myc. En los ensayos que incluyeron los htAbs, las células madre pluripotentes inducidas humanas se anclaron a los sarcómeros del miocardio con una eficiencia, estadísticamente, significativamente mayor, que en los ensayos con anticuerpos no específicos o sin ellos (p < 0,001). Además, la aplicación de los htAbs resultó en la reticulación de las proteínas sarcoméricas para crear los andamiajes estables para el anclaje de las células madre. A partir de entonces, estas células madre pluripotentes inducidas humanas se diferenciaron en cardiomiocitos en sus sitios de anclaje. Mediante la bioingeniería de estos nuevos anticuerpos tetravalentes heteroespecíficos y su uso para guiar y anclar las células madre específicamente a los andamios sarcoméricos estabilizados , demostramos la prueba de concepto in vitro para mejorar la eficacia de la terapia regenerativa del infarto de miocardio y creamos las bases para los ensayos in vivo.