Química moderna y aplicaciones

Abstracto

Mejoras en la cromatografía líquida de alto rendimiento y en las condiciones de extracción para el análisis de ácidos grasos oxidados utilizando una columna de centrifugación de modo mixto

Takao Sanaki, Takuji Fujihara, Ryo Iwamoto, Takeshi Yoshioka*, Kenichi Higashino, Toru Nakano y Yoshito Numata

La lipidómica mediante cromatografía líquida/espectrometría de masas se ha utilizado para comprender mejor el papel de los ácidos grasos oxidados en el desarrollo de diversas enfermedades. Sin embargo, se requiere más trabajo para mejorar el proceso de preparación de muestras y la formación de colas de pico de los cisteinil-leucotrienos. En este estudio, evaluamos varias fases móviles y condiciones de extracción. La adición de ácido fosfórico a la fase móvil mejoró la formación de colas de pico de los cisteinil-leucotrienos. Las condiciones de extracción también se optimizaron mediante una columna de centrifugación que posee propiedades de intercambio aniónico y de fase reversa. Se examinó la eficiencia de extracción del sistema de extracción modificado utilizando 62 lípidos y se investigaron 13 lípidos deuterados para evaluar los efectos de la matriz y la recuperación de muestras de homogeneizado de pulmón de ratón. Se obtuvieron eficiencias de extracción de ≥70% para casi todos los lípidos. Se obtuvieron buenos resultados con desviaciones estándar de <15% para los efectos de la matriz y la recuperación. Finalmente, se comparó la eficiencia de nuestro método de extracción con la de varios métodos convencionales, y la del leucotrieno C4 mejoró significativamente con nuestro método. Además, la proporción de varianza entre nuestro método y los métodos convencionales fue >0,99 para todos los lípidos analizados. Por lo tanto, este nuevo método desarrollado representa una herramienta poderosa para analizar los lípidos.