Christopher Duntsch, Erika Dillard y Umar Akbar
Este informe detalla el aislamiento, cultivo y caracterización de células madre de disco espinal derivadas de muestras de tejido de disco espinal adulto humano. Utilizando métodos de cultivo en suspensión de células madre y biología, se aislaron células madre de disco espinal adulto humano y se cultivaron monoclonalmente en racimos multicelulares similares a esferas (discoesferas). Las discoesferas de la primera serie de cultivos se recolectaron, procesaron y se volvieron a sembrar como células madre individuales para estudios de expansión en serie utilizando cultivo en suspensión, demostrando que era posible la expansión lineal. Las discoesferas y las células madre de disco espinal adulto se sembraron en superficies de cultivo recubiertas de matriz en medios de células madre durante varias horas para permitir la fijación y se analizaron para los biomarcadores de células madre. Las discoesferas y las células madre de disco espinal adulto se sembraron en superficies de cultivo recubiertas de laminina en medios condrogénicos y condiciones de cultivo durante 14 días para diferenciarlas en células NP. Las células NP cultivadas a partir de estos experimentos demostraron morfología y fenotipo NP; expresión de biomarcadores NP, secreción de matriz extracelular y la capacidad de ser pasadas en serie con una posible expansión de gran volumen. Los estudios de ingeniería tisular que utilizan el “ensayo cinético de explosión” demostraron que las discoesferas tienen una notable biología intrínseca de desarrollo y de ingeniería tisular que es robusta y organizada. En resumen, se han aislado, cultivado y caracterizado células madre de disco adultas y células NP a partir de tejidos sanos de disco espinal. Estos hallazgos demuestran el importante potencial que se puede explorar para el uso de la ingeniería tisular basada en células madre para el tratamiento de la enfermedad degenerativa del disco (EDD).