Revista de tecnología microbiana y bioquímica

Abstracto

Aislamiento y purificación de L-asparaginasa de alta eficiencia mediante electroforesis SDS PAGE de elución continua preparativa cuantitativa

Senthil Kumar M y Selvam K

Se aisló una L-asparaginasa libre de glutaminasa extracelular única de nuevos actinomicetos marinos hasta obtener una homogeneidad perceptible en desechos agroindustriales. La electroforesis SDS PAGE de elución continua preparativa cuantitativa es un método de alta resolución para el aislamiento preparativo de L-asparaginasa en muestras biológicas. La enzima se purificó 248,68 veces y mostró una actividad específica final de 5035,28 IU/mg con un rendimiento del 80,71%. La enzima homotetrámera tiene una masa molecular de 133,25 kDa y un punto isoeléctrico de aproximadamente 5,4. Se encontró que los parámetros cinéticos, Km y Vmax de la L-asparaginasa purificada de Streptomyces radiopugnans MS1 eran 0,0598, 3,5478 IU μg - 1 respectivamente. La estrategia de secuenciación de novo que se presenta aquí proporciona un medio rápido y confiable para identificar proteínas en Streptomyces radiopugnans MS1. La L-asparaginasa purificada no tiene actividad de glutaminasa, lo que puede disminuir el margen de efectos secundarios durante el tratamiento antineoplásico.