Revista de carcinogénesis y mutagénesis

Abstracto

La expresión de L-plastina en células colorrectales HCT 116 aumenta la migración y las ROS de manera dependiente de la NADPH oxidasa

Eilis Foran, Michael Freeley, Aideen Long

Objetivo: La L-plastina es una proteína que agrupa acciones y que normalmente se expresa en células de origen hematopoyético, pero que también se asocia con la transformación maligna. La expresión aberrante de la L-plastina se correlaciona con el estadio tumoral en los cánceres colorrectales, y la expresión ectópica de la L-plastina en las líneas celulares del cáncer de colon aumenta la proliferación y la migración. La L-plastina se fosforila de forma inducible en Ser ⁵ en respuesta a una variedad de estímulos, pero no se ha caracterizado el papel de la L-plastina fosforilada en las células del cáncer de colon. El objetivo de este estudio fue analizar el efecto de la fosforilación de la Ser ⁵ de la L-plastina en la proliferación y migración de las células del cáncer de colon HCT 116.

Métodos: Se expresó L-plastina de tipo salvaje o un mutante de L-plastina Ser ⁵ en el que la serina se intercambió por una alanina no fosforilable en células HCT 116. La proliferación celular se evaluó mediante recuento celular y activación de ciclina D. La migración celular se evaluó mediante ensayos de migración transwell.

Resultados: Encontramos que la L-plastina de tipo salvaje se fosforiló constitutivamente en Ser ⁵ cuando se expresó en células HCT 116 y promovió una mayor tasa de proliferación de estas células. Las células HCT 116 que expresaban de forma estable la L-plastina de tipo salvaje también aumentaron la capacidad migratoria de estas células junto con mayores niveles de especies reactivas de oxígeno. Las NADPH oxidasas son las principales fuentes intracelulares de especies reactivas de oxígeno y la inhibición de la actividad de la NADPH oxidasa con el inhibidor farmacológico DPI disminuyó la migración de estas células. Curiosamente, la expresión de un mutante de L-plastina con una alanina no fosforilable en lugar de Ser ⁵ no promovió una mayor proliferación celular, lo que indica que la fosforilación es necesaria para este proceso. Por el contrario, la migración celular y la producción de ROS fueron independientes del estado de fosforilación de Ser ⁵ .

Conclusión: Estos datos demuestran que la expresión de L-plastina en células de cáncer de colon HCT 116 aumenta la migración de una manera que depende de la NADPH oxidasa pero es independiente del estado de fosforilación de Ser ⁵ .