Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Integración de vectores lentivirales de miRNA y eficacia de la focalización génica en progenitores cardíacos

Mariana Lopérfido, Stefania Crippa y Maurilio Sampaolesi

Las células madre y progenitoras cardíacas son un reto para su posible aplicación en terapia celular. Varios laboratorios de investigación están explotando la viabilidad de la terapia celular autóloga para eliminar los tratamientos inmunosupresores responsables de los efectos secundarios indeseables. Recientemente, demostramos que las células progenitoras cardíacas aisladas de ratones sin Sgcb, modelo animal de distrofia muscular de cinturas de tipo 2E, experimentan una diferenciación aberrante in vitro e in vivo debido a la desregulación de miR669. Esta familia de miRNA es capaz de inhibir el programa miogénico esquelético que se dirige directamente a MyoD 3' UTR. Mediante el uso de tecnología lentiviral, proporcionamos evidencia de que es posible rescatar el fenotipo aberrante distrófico mediante la sobreexpresión de miRNA669 sin corrección genética. Sin embargo, no se analizó cómo se posicionaron los virus que llevan los miRNA en el genoma tras la transducción y cómo su sitio de localización podría influir en el potencial de rescate. En este trabajo investigamos el perfil de integración del vector lentiviral que porta el pre-miR669 en poblaciones policlonales y clonales infectadas derivadas de progenitores cardíacos Sgcb. Nuestro estudio revela que los sitios de inserción retroviral (RIS) están restringidos en gran medida a genes codificantes (65%). A pesar de la limitación de nuestro análisis, no encontramos coincidencias para genes relacionados con el cáncer y varios RIS secuenciados sacaron a la luz genes principalmente involucrados en la función muscular. Por lo tanto, nuestros datos muestran que el perfil de inserción del vector lentiviral es específico de la célula; sin embargo, el estado de la cromatina de las células diana influye positivamente en las integraciones virales.