Revista de Bacteriología y Parasitología

Abstracto

Enfoques moleculares en la detección y caracterización de Leptospira

Ahmed Ahmed, Martin P. Grobusch, Paul R. Klatser y Rudy A. Hartskeerl

El diagnóstico convencional de la leptospirosis y la caracterización de las especies de Leptospira se basan principalmente en la serología. Un inconveniente importante de la serología en el diagnóstico es que necesita niveles suficientes de anticuerpos anti-Leptospira, lo que pone en peligro la confirmación en la fase aguda temprana de la enfermedad. La prueba de absorción de aglutininas cruzadas (CAAT) que determina los serotipos de Leptospira es un método técnicamente exigente y laborioso y, por lo tanto, solo se realiza en unos pocos laboratorios. Las nuevas pruebas de diagnóstico molecular se basan principalmente en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La PCR complementa perfectamente las pruebas serológicas, ya que es especialmente sensible en los primeros 5 días después de la aparición de los síntomas. La PCR en tiempo real es rápida y ha sido validada por su alta precisión clínica. La introducción de técnicas moleculares para definir las especies de Leptospira revolucionó la categorización de las cepas de este género, ya que las especies y los serogrupos parecían mostrar poca correlación. La prueba de referencia en la especiación molecular se basa en la determinación de la homología del ADN. Este enfoque es tedioso y poco fácil de usar y, por lo tanto, se reemplaza cada vez más por otras técnicas. Hasta la fecha, se dispone de una gran cantidad de métodos de tipificación molecular. Los más atractivos son aquellos que proporcionan datos digitales y electrónicos directos. Dichas técnicas incluyen el polimorfismo de longitud de fragmentos amplificados por fluorescencia (FAFLP), la tipificación por matriz, el análisis de número variable de repeticiones en tándem de múltiples loci (MLVA) y la filogenia basada en secuencias, y en cierta medida la electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE). La tipificación de secuencias de múltiples loci (MLST) es el método más sólido para determinar la diversidad de cepas de Leptospira y en el futuro probablemente solo será superada por la filogenia en secuencias de genoma completo.