Teresa Lopes da Silva, Daniela Feijão y Alberto Reis
Se utilizó citometría de flujo multiparamétrica para monitorear la respuesta al estrés de R. glutinis durante una fermentación en lotes alimentados, a través de la viabilidad celular, el contenido de lípidos y la dispersión de luz intrínseca. Durante la fermentación de la levadura, la proporción de células con membrana permeabilizada (células muertas) aumentó cuando los nutrientes y/o el oxígeno se volvieron limitantes. Las células de levadura mostraron un nivel de daño más alto cuando crecieron en otras condiciones de limitación de nutrientes que en condiciones de limitación de oxígeno, ya que las células muertas redujeron su contenido interno y tamaño en la primera situación, lo que sugiere una lisis celular. drástica.
El contenido máximo de lípidos de la levadura fue del 8 % (p/p) en t=38,3 h. Este bajo contenido de lípidos se atribuyó a la limitación de oxígeno, lo que resalta la importancia de la tasa de transferencia de oxígeno al producir lípidos a partir de cultivos de levadura aeróbica.
Se detectaron cambios en las señales de luz de dispersión frontal y lateral durante el crecimiento de la levadura, lo que puede proporcionar una forma útil y rápida de identificar la fase de crecimiento de la levadura.
El enfoque multiparamétrico aquí presentado representa un mejor sistema de control basado en el nivel de células individuales que se puede utilizar para optimizar el rendimiento del bioproceso de levadura y también se puede utilizar para la selección rápida de cepas de levadura para la producción de aceite de una sola célula.