Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

La diferenciación celular similar a la de los monocitos/macrófagos inducida por TPA en las células HL60 conduce a la pérdida de la acetilación de la lisina 16 de la histona H4

Rahul Kumar Vempati

El 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA) es un éster de forbol que induce la diferenciación celular similar a la de los monocitos/macrófagos en las células HL60. Los niveles y patrones de expresión génica difieren en gran medida entre las células HL60 diferenciadas e indiferenciadas. Las modificaciones epigenéticas de las histonas desempeñan un papel crucial en la activación transcripcional y las alteraciones en los niveles de modificación afectan en gran medida el patrón de expresión génica. La acetilación de la histona H4 lisina 16 (H4K16ac) es una de esas modificaciones y tiene un papel importante en la activación transcripcional. Los cambios en su nivel de acetilación, ya sea debido a un efecto fisiológico o patológico, tendrán un efecto dramático en la expresión génica celular. En este estudio, se realizó un estudio para ver el efecto de la diferenciación inducida por TPA en los niveles de H4K16ac en las células HL60. Los resultados obtenidos del análisis de citometría de flujo mostraron la expresión del marcador de superficie celular de macrófagos CD11b en células HL60 diferenciadas con TPA y los Western blots revelaron una regulación negativa drástica de H4K16ac en células diferenciadas. El ensayo de inmunotransferencia y co-inmunoprecipitación reveló una mejora dependiente del daño del ADN de la acetilación de H4K16 y su co-localización con γH2AX en células indiferenciadas. Mientras que las células diferenciadas con TPA (CD11B+ve) no mostraron ninguna mejora de este tipo en los niveles de acetilación de H4K16 en presencia de daño del ADN. El presente estudio muestra que la diferenciación inducida por TPA de células HL60 en macrófagos conduce a la regulación negativa de la acetilación de H4K16.