Revista de enfermedades tropicales y salud pública

Abstracto

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada en portaobjetos teñidos y fijados en comparación con sangre completa como fuente de ADN en el sudeste de Irán

Ebrahimzadeh Adel, Mohammadi Saeed y Polshekan Mir Ali

El examen microscópico de frotis de sangre gruesa (TBS) sigue siendo el método de elección para el diagnóstico de la malaria humana. Recientemente, se han utilizado métodos de diagnóstico alternativos, como la PCR anidada, para la detección e identificación de los parásitos de la malaria. El objetivo de este estudio fue comparar la sensibilidad y especificidad de la PCR anidada realizada utilizando ADN extraído de sangre completa frente a portaobjetos teñidos fijados. Se realizaron exámenes con 125 muestras de sangre, incluidas 76 (60,8%) de varones y 49 (40,2%) de mujeres. El porcentaje de parasitemia en muestras positivas se calculó a partir de un recuento total de 200 leucocitos contados en un frotis de sangre fino teñido con Giemsa. El ensayo de PCR anidada realizado en muestras de ADN extraído mediante cebadores específicos para amplificar el gen de ARN 18ssr de Plasmodium. De las 125 muestras de sangre, 50 (40%) fueron positivas (41 (32,8%) P. vivax, 9 (7,2%) P. falciparum) y 75 (60%) fueron negativas para parásitos de malaria mediante examen microscópico. La PCR anidada en muestras de sangre completa detectó 66 (52,8%) especies de plasmodium: 47 (37,6%) P. vivax, 13 (10,4%) P. falciparum, 6 (4,8%) infecciones mixtas P. vivax y P. falciparum. La PCR anidada en portaobjetos de sangre periférica detectó 49 (39,2%) especies de plasmodium: 34 (27,2%) P. vivax, 10 (8%) P. falciparum, 5 (4%) infecciones mixtas P. vivax y P. falciparum. El estudio demostró que la sensibilidad y especificidad de la PCR anidada fueron del 96% y 76%, respectivamente, cuando el ADN diana se extrajo de la sangre y del 78% y 86% cuando el ADN se obtuvo de frotis. Estos estudios demostraron que el ADN de Plasmodium podría aislarse con éxito del TBS, lo que indica que este método de conservación del ADN podría considerarse adecuado y conveniente para estudios epidemiológicos.