Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Crecimiento neuronal y glial en cultivos organotípicos después de la vitrificación

Arav Amir, Shahar Abraham, Ziv-Polat Ofra, Natan Yehudit y Patrizio Pasquale

Los ganglios de la raíz dorsal (DRG) y las secciones de la médula espinal (SC) de fetos de rata se vitrificaron en un nuevo sistema de vitrificación semiautomático, se enfriaron en aire líquido granizado estéril (SLA) y se almacenaron en un recipiente especial sellado estéril en nitrógeno líquido (LN). Después de calentarlos, se realizaron cultivos estacionarios organotípicos utilizando NVR-Gel (compuesto principalmente de ácido hialurónico y laminina) y enriquecido con factores neuronales conjugados con nanopartículas de óxido de hierro. La evaluación de los cultivos se realizó mediante observaciones diarias de microscopía de contraste de fase y mediante tinción inmunofluorescente.
Los resultados revelaron que las neuronas SC mantuvieron su forma multipolar y regeneraron dendritas y axones. Las neuronas DRG de forma redonda exhibieron núcleos eucromáticos con nucléolos prominentes y una regeneración activa de los procesos nerviosos. La migración tanto de neuronas como de células planas (fibroblastos y células de Schwann de la glía) comenzó dentro de las 48 horas posteriores a la siembra y se intensificó en los días siguientes.
En conclusión, se puede decir que el uso de vitrificación semiautomática, vitrificación estéril y almacenamiento estéril de tejidos neuronales del SNC y del SNP es una tecnología avanzada exitosa para la preservación de neuronas y células gliales, como se demuestra en la recuperación de un patrón de crecimiento completo y regular en cultivo. Esto puede ser un paso importante hacia el uso clínico en la reconstrucción de lesiones graves de los nervios periféricos y la médula espinal.