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Abstracto
La vía de señalización Keap1a/Nrf2 activadora de Nitazoxanida está regulada por Cul3 de Criataria plicata
Wuting Lu, Feixiang Su, Fanhua Yang, Jinhua An, Baoqing Hu, Shaoqing Jian, Gang Yang*, Chungen Wen*
Cul3 regula la ubiquitinación y degradación de Nrf2 en la vía Nrf2/keap1a en condiciones normales. En invertebrados acuáticos, se estudió el mecanismo relacionado de activación del estrés oxidativo en mejillones estimulando Cristatra plicata con Nitazoxanida (NTZ). Se clonó el gen Cul3 de longitud completa de C. plicata , designado CpCul3 . El análisis comparativo de la secuencia del gen CpCul3 y sus genes homólogos mostró que el gen CpCul3 era muy similar a los genes homólogos de otras especies en la secuencia de aminoácidos. La secuencia de aminoácidos de CpCul3 es 78%-98% similar a la de otros invertebrados. En el árbol filogenético, el gen CpCul3 está más estrechamente relacionado con el gen Cul3 en otros bivalvos. Después de la estimulación con NTZ, el nivel de expresión del ARNm de CpCul3 aumentó en el hepatopáncreas de C. plicata . El nivel de expresión de la proteína CpCul3 se detectó utilizando el anticuerpo específico de CpCul3 , y el nivel de expresión también aumentó. Los resultados de la localización subcelular de CpCul3 en HEK293T indicaron que CpCul3 podría co-localizarse con mitocondrias, lisosomas y retículo endoplásmico, y la colocalización con mitocondrias es más obvia. Los resultados indicaron que CpCul3 puede desempeñar un papel importante en la regulación del estrés oxidativo. El experimento CoIP demostró que CpCul3 podría promover la degradación por ubiquitinación de CpNrf2. Por último, CpNrf2 podría degradarse por ubiquitinación mediada por K48.