Liu G
Objetivo: La terapia de reemplazo de células madre mediante la reprogramación de células somáticas es una terapia prospectiva significativa para las enfermedades neurodegenerativas y la medicina personalizada. Como los genes de reprogramación portadores de virus implican un riesgo considerable de formación de tumores, los enfoques actuales tienden a reemplazar el patrón viral con un sistema no viral. Sin embargo, todavía existe una gran preocupación con respecto a las propiedades oncogénicas de estos genes de reprogramación. En la actualidad, no hay evidencia directa que pueda verificar que los sistemas no virales no influyan en la integración del ADN genómico y los eventos de mutagénesis en los productos finales después de la reprogramación.
Métodos: Evaluamos el riesgo potencial de cáncer de las neuronas dopaminérgicas derivadas de células madre reprogramadas utilizando un vector no viral único que contiene cuatro genes de reprogramación. Las neuronas dopaminérgicas derivadas de células madre reprogramadas fueron los productos finales después de 50 días de cultivo celular de fibroblastos de ratones adultos. Después de 6 meses de cultivo, se evaluó el riesgo de cáncer de estas células.
Resultados: Las evaluaciones generales del riesgo de cáncer se examinaron primero utilizando múltiples biomarcadores de células madre. No detectamos ninguna sobreexpresión de estos biomarcadores. Además, evaluamos si los factores de neurotransmisión más importantes se expresaban o no después de 6 meses en cultivo celular masivo. Nuestros resultados determinaron que solo se detectó una expresión génica robusta de la tirosina hidroxilasa (TH), como enzima limitante de la velocidad en la síntesis de dopamina. Además, el producto final de las neuronas dopaminérgicas TH-positivas se confirmó mediante la secuenciación del ADN genómico de TH. Nuestros datos sugirieron que ninguno de los cuatro genes de reprogramación se integró en el ADN genómico de la célula huésped y que no se produjeron otros eventos de mutagénesis después de la secuenciación génica del ADN genómico de TH relacionado con 13 exones codificantes completos con regiones no traducidas parciales de dos extremos.
Conclusión: Se demostró que las neuronas dopaminérgicas derivadas de fibroblastos de ratón adulto reprogramados son una tecnología y un enfoque seguros como posible terapia para enfermedades neurodegenerativas.