Clínicas en Salud Maternoinfantil

Abstracto

Pruebas prenatales no invasivas de aneuploidías fetales mediante un nuevo método basado en PCR digital de gotas y ADN fetal libre de células

Wang Haidong, Yang Zhijie, Wang Youxiang, Gian Carlo Di Renzo, Elena Picchiassi, Federica Tarquini, Giuliana Coata, Wang You, Chen Yu

Antecedentes: Las pruebas prenatales no invasivas basadas en secuenciación de nueva generación (NGS) y microarrays (NIPT) actuales, que se utilizan para la detección de trisomías fetales comunes, siguen siendo costosas, requieren mucho tiempo y deben realizarse en laboratorios centralizados. Para mejorar las NIPT en la práctica clínica de rutina como detección prenatal universal, hemos desarrollado un ensayo basado en PCR de gotas digitales (ddPCR) llamado iSAFE NIPT que utiliza ADN fetal libre de células (cffDNA) para la detección de trisomías fetales 13, 18 y 21 en una sola reacción con la ventaja de una alta precisión diagnóstica y un costo reducido.

Materiales y métodos: En primer lugar, utilizamos muestras de ADN artificial para evaluar la sensibilidad y especificidad analíticas del iSAFE NIPT. A continuación, analizamos 269 muestras de plasma para la validación clínica del iSAFE NIPT. Cincuenta y ocho de ellas, incluidas cinco trisomías 21, dos trisomías 18 y una trisomía 13, se utilizaron para establecer los valores de corte del ensayo basados ​​en las proporciones entre los recuentos cromosómicos. Las 211 muestras de plasma restantes, incluidas 10 trisomías 21, se analizaron para evaluar el rendimiento clínico del iSAFE NIPT.

Resultados: iSAFE NIPT logró una sensibilidad analítica del 100% (IC del 95%: 94,9-100% para trisomía 21; 79,4-100% para trisomía 18; 73,5-100% para trisomía 13) y una especificidad del 100% (IC del 95%: 96,3-100% para trisomía 21; 97,6-100% para trisomía 18; 97,6-100% para trisomía 13). También logró una sensibilidad y especificidad clínicas del 100% para la detección de trisomía 21 en las 211 muestras clínicas (IC del 95% para la sensibilidad: 69,1-100%, y IC del 95% para la especificidad: 98,2-100%).

Conclusión: El iSAFE NIPT es un ensayo basado en ddPCR altamente multiplexado para la detección de trisomías fetales en sangre materna. Basado en la validación clínica, el iSAFE NIPT tiene una alta sensibilidad y especificidad diagnósticas. Puede descentralizarse en laboratorios clínicos de rutina, es rápido, fácil de usar y económico en comparación con el NIPT actual.