Revista de Petróleo y Biotecnología Ambiental

Abstracto

Optimización del protocolo RAPD-PCR para el cribado de Jatropha curcas y Gossypium hirsutum cultivados en suelo contaminado con metales

Narayanan Mathiyazhagan y Devarajan Natarajan

Se realizó la optimización del protocolo de reacción en cadena de la polimerasa de ADN polimórfico amplificado aleatoriamente (RAPD-PCR) para examinar dos plantas (Jatropha curcas y Gossypium hirsutum) cultivadas en suelos contaminados con metales. Se empleó un método CTAB para la extracción de ADN, pero se llevó a cabo un tratamiento con ARNasa durante la noche para eliminar los contaminantes de ARN. El ADN aislado se utiliza para la amplificación RAPD-PCR. La condición óptima para una amplificación confiable requiere una mayor concentración de MgCl 2 (3 mM), cebador (2,5 μM), Taq ADN polimerasa (1 unidad) y 3 μl de ADN molde (muestra) y una temperatura de hibridación de 55 °C. Se observaron productos amplificados reproducibles en estas condiciones para ambas especies de plantas.