Tecnología genética

Abstracto

Caracterización fenotípica y genotípica de Carnobacterium divergens aislado de carne cruda picada de vacuno tunecina refrigerada

Thouraya Mokrani, Ines Essid, Mnasser Hassouna, Lachheb Jihene, Ghram Abdeljalil y Ahlem Jouini

Se aislaron seis cepas psicotrópicas de Carnobacterium divergens de carne cruda picada de vacuno tunecina envasada y almacenada a 6 °C. Se identificaron primero mediante métodos bioquímicos, utilizando reacciones bioquímicas y fermentación de carbohidratos antes de su caracterización mediante técnicas moleculares. La cepa de Carnobacterium divergens es un bacilo psicotrópico grampositivo inmóvil que carece de catalasa, oxidasa y manitol. Crece a pH 9,1 (agar D-MRS), pero no en agar acetato (pH ≤ 5,4). Para todos estos aislados, la identificación fenotípica, utilizando el sistema API 50 CHL, reveló una variabilidad en las capacidades de fermentación de algunos azúcares (glicerol, amigdalina, arbutina, D-trehalosa y gluconato de potasio). Se utilizaron cebadores de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) específicos de la especie para garantizar la identificación de estas cepas aisladas a nivel de especie. Además, la secuenciación del gen 16S rRNA confirmó que los seis aislamientos se identifican como C. divergens. Se realizó la técnica Rep-PCR para investigar la diversidad intraespecífica dentro de estas seis cepas de C. divergens, comúnmente identificadas en la carne. El método Rep-PCR distinguió las cepas de C. divergens, demostrando su biodiversidad y sus evidentes similitudes. Los cebadores BOX y REP permitieron la amplificación con un 85% y un 80% de similitudes entre las cepas, respectivamente. Se demostró que los cebadores BOXA1R y REP son útiles para la diferenciación de las cepas de C. divergens.