Tecnología de fermentación

Abstracto

Producción y caracterización parcial de lipasa de Pseudomonas putida

Huda Fatima, Natasha Khan, Asad Ur Rehman, Zahid Hussain

La producción de lipasa a partir de Pseudomonas putida 922 se optimizó modificando varios parámetros físicos como la fuente de carbono, la fuente de nitrógeno, el pH, la concentración de sal y los parámetros bioquímicos del medio de producción como la temperatura y el tiempo de incubación del medio de crecimiento. También se utilizaron tortas de aceite como fuente de carbono para comprobar si había una mayor producción de la enzima. Se descubrió que la bacteria tenía un crecimiento máximo a pH 10, siendo la producción de enzima más alta (24 U/ml) después de 48 horas a 30°C y pH 10. La composición óptima del medio fue torta de aceite de mostaza como fuente de carbono, extracto de levadura o peptona como fuente de nitrógeno y una concentración de cloruro de sodio del 1%. Se realizó una caracterización parcial de la enzima, donde se descubrió que el pH y la temperatura de trabajo óptimos eran 10 y 40ºC, respectivamente. Se descubrió que la estabilidad de la enzima se encontraba en los rangos de pH y temperatura de 5-11 y 30-40ºC, respectivamente. La purificación parcial de la enzima se realizó a una saturación de sulfato de amonio del 80%. La masa molecular de la lipasa se determinó mediante SDS PAGE y se encontró que era de 45 kDa.