Revista de tecnología microbiana y bioquímica

Abstracto

Producción, purificación y caracterización de L-asparaginasa de Aspergillus sp. ALAA-2000 endofítico marino bajo fermentación sumergida y en estado sólido

Mervat Morsy Abbas Ahmed, Nageh Abo Dahab F, Taher Taha M y Fareed Hassan SM

Entre todos los hongos endófitos recuperados de la esponja marina blanda Aplysina fistularis, el 72,2% fue capaz de producir L-asparaginasa. Entre todos los aislados obtenidos, Aspergillus sp. ALAA-2000, el productor hiperactivo del agente anticancerígeno, L-asparaginasa, bajo fermentación sumergida (SMF) y fermentación en estado sólido (SSF) de diferentes desechos agrícolas, fue seleccionado para la optimización del proceso de extracción; optimización de parámetros fisicoquímicos, que afectan la producción de L-asparaginasas en SSF y optimización de los parámetros de L-asparaginasas purificadas. La actividad máxima de L-asparaginasa 23,34 U/ml se recuperó de soja con agua caliente a 40 °C y 150 rpm durante 30 min bajo SSF y 30,64 U/ml bajo fermentación sumergida usando glucosa como fuente de carbono y asparagina como fuente de nitrógeno. Se purificaron dos tipos de L-asparaginasa (AYA-1 y AYA-2) a partir del sobrenadante de cultivo de Aspergillus sp. ALAA-2000 mediante precipitación con sulfato de amonio y cromatografía de filtración en gel (Sephadex G-200). Los pesos moleculares de las enzimas fueron 25 kDa (AYA-1) y 31 kDa (AYA-2). Los parámetros de la L-asparaginasa purificada se optimizaron para la enzima AYA-1 (pH 6,0, estable a 30 °C a 50 °C durante 60 min, tiempo de reacción 15 min y concentración de sustrato 1,275 mg/ml) y la enzima AYA-2 (pH 10, estable a 30 °C a 70 °C durante 60 min, tiempo de reacción 15 min y concentración de sustrato 1,275 mg/ml). Mientras que los inhibidores de metaloproteasas, los agentes quelantes EDTA, no tuvieron efecto sobre la L-asparaginasa. Estos hallazgos sugieren que la L-asparaginasa no era metaloproteasa.