Bioenergética: acceso abierto

Abstracto

Recomendaciones para el cultivo a corto plazo de cardiomiocitos viables en forma de bastón de rata

Rabia Johnson, PhiwayinkosiVusi Dludla, Christo John Frederick Muller, Faghri February y Johan Louw

Los cultivos primarios in vitro de cardiomiocitos de rata adultos aislados se están convirtiendo en un modelo cada vez más popular para estudiar los factores estresantes del músculo cardíaco. Este modelo se puede manipular fácilmente en un entorno controlado y los resultados obtenidos pueden proporcionar información valiosa sobre la fisiopatología de la enfermedad cardíaca. En los últimos años se han descrito varias metodologías mejoradas en el desarrollo de una técnica robusta para ayudar a mantener los cardiomiocitos en cultivo. Sin embargo, a pesar de estos avances, el cultivo de cardiomiocitos primarios sigue siendo un desafío. En este estudio, presentamos un método simple pero reproducible para el aislamiento y cultivo de cardiomiocitos viables en forma de bastón. Los cardiomiocitos se mantuvieron en Medio 199 suplementado con o sin suero bovino fetal. Su viabilidad se evaluó utilizando azul tripán mientras que la actividad metabólica se midió utilizando un ensayo de adenosina 5'-trifosfato. Los resultados obtenidos en este estudio se utilizaron para proporcionar pautas generales para evitar los problemas relacionados con los bajos rendimientos de cardiomiocitos y la posterior mala capacidad de cultivo de cardiomiocitos. Los cardiomiocitos aislados cultivados en presencia de suero bovino fetal mantuvieron su morfología en forma de bastón estriado in vitro durante 72 h en cultivo, después de lo cual se aplanaron y se expandieron. Mientras que los cardiomiocitos cultivados en ausencia de suero bovino fetal mantuvieron su forma de bastón hasta 120 h.