Revista de Investigación y Desarrollo Acuícola

Abstracto

Función de la regulación de PmRab7 en la infección por WSSV y validación funcional de una pequeña molécula como inhibidor de la GTPasa PmRab7

Amrendra Kumar, Sudhanshu Shekhar y Saravanakumar A*

El síndrome de la mancha blanca (WSS) es una enfermedad viral que ha amenazado ampliamente a las industrias de cultivo de camarón. Es causada por el baculovirus del síndrome de la mancha blanca (WSSB). Los camarones (P. monodon y L. vannamei) son incapaces de defenderse de materiales "ajenos" y patógenos, debido a una respuesta inmune adaptativa menos definida. Por lo tanto, el presente trabajo se tomó como prioridad para estudiar la regulación de la transcripción de PmRab7, que podría ser un receptor para WSSV (vP28) después de la implicación de un inhibidor de moléculas pequeñas. Inicialmente, se examinaron un total de 70 moléculas pequeñas de GTPasa, contra la estructura 3D de PmRab7. Entre todas, se seleccionó la molécula CID 1067700 para el acoplamiento molecular (IFD) con PmRab7 en presencia de GTP, GDP y Mg++. Además, se alimentó a P. monodon con una molécula pequeña en la formulación de alimento y se cuantificó relativamente la regulación transcripcional de PmRab7 contra IFN-α como genes de mantenimiento durante la infección por WSSV. En este trabajo, identificamos un inhibidor de PmRab7, CID 1067700, al dirigirse al dominio de unión al ADN de PmRab7 mediante una estrategia de detección virtual. CID 1067700 suprime preferentemente la actividad de la GTPasa para alterar el GTP y el Mg++ de sus posiciones. Además, CID 1067700 inhibe la expresión de los genes diana posteriores de PmRab7, por lo que CID 1067700 representa nuevas sondas para el desarrollo de inhibidores específicos dirigidos al dominio de unión al ADN de PmRab7 y un posible tratamiento contra el WSSV. Se observaron cambios sustanciales en la regulación de PmRab7 y la multiplicación de WSSV en el ensayo inicial de CID 106700. CID 106700 conduce a la inactivación exitosa de PmRab7 al alterar el GTP y el Mg++ de sus posiciones nativas. La regulación de PmRab7 aumentó de 5 a 8 veces durante 72 horas de infección. La sustitución de GTP por moléculas pequeñas ha revelado una regulación significativamente negativa del gen PmRab7 durante la infección por WSSV. Sorprendentemente, también se ha descubierto que la carga viral (cuantificada de forma absoluta) se reduce cuando se regula negativamente el gen PmRab7. La internalización del WSSV se ha relacionado directamente con la regulación del gen PmRab7.