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Abstracto
El suero producido a partir de plasma fresco congelado y criosobrenadante vencido favorece la proliferación de células humanas: alternativas rentables al suero fetal bovino
Kazuki Ishiyama, Mika Ogawa, Hidefumi Kato, Kyosuke Takeshita, Ryuzo Ueda, Takayuki Nakayama*
Antecedentes: El suero fetal bovino (FBS) es el factor de crecimiento más común utilizado en cultivos celulares. Sin embargo, a medida que se expanden las terapias celulares, aumentan las demandas de suplementos para cultivos celulares libres de xenobacterias que cumplan con los estándares de buenas prácticas de fabricación. Se ha propuesto el suero humano como una alternativa al FBS. Debido a la disponibilidad limitada de donantes y al uso eficaz de los recursos médicos, intentamos producir suero a partir de plasma fresco congelado (FFP) y criosobrenadante (CS) vencidos y los probamos como sustitutos del FBS.
Resultados: Encontramos que la incubación de 1 hora de FFP o CS con un nivel fisiológico de trombina y cloruro de calcio (CaCl 2 ) agotó virtualmente todo el fibrinógeno. Estudios comparativos de proliferación con FBS y lisados de plaquetas humanas (hPLs) mostraron que comparado con FBS, FFP-suero exhibió efectos proliferativos similares o mayores en 8 líneas celulares humanas: Células estromales mesenquimales derivadas de médula ósea (BMSC), Células estromales mesenquimales derivadas de tejido adiposo (ADSC), HeLa, 293T, MG-63, HL-60, K562 y Meg-A2 excepto para células Saos-2, mientras que CS-suero exhibió efectos proliferativos más débiles en células BMSC, ADSC y Saos-2. hPL promovió el crecimiento de células BMSC y ADSC más vigorosamente que FFP- y CS-suero.
Conclusiones: El suero FFP y el suero CS se pueden producir con trombina y CaCl2 rápidamente y de manera que se ahorren productos sanguíneos y funcionan como alternativas potentes al FBS para el cultivo de células humanas.