Revista de Bacteriología y Parasitología

Abstracto

Identificación de especies de bacterias y hongos en medios de cultivo sólidos y líquidos mediante espectrometría de masas MALDI-TOF

Marco Reich, Philipp P. Bosshard, Maik Stark, Kurt Beyser y Stefan Borgmann

En los últimos años, la espectrometría de masas MALDI-TOF se ha convertido en una herramienta poderosa para la identificación de especies de bacterias y hongos cultivados. En el presente estudio, se describe la implementación de la espectrometría de masas MALDI-TOF en un laboratorio comercial de alto rendimiento. Se evaluó el impacto de diferentes condiciones de crecimiento en los resultados de identificación. Aunque se notaron ligeras diferencias en los espectros MALDI-TOF de las cepas de E. coli y S. aureus cultivadas en agar sangre durante varios períodos (5, 18, 24 y 48 horas), se obtuvo una identificación confiable de las especies para todos los períodos. Lo mismo sucedió cuando las cepas de E. coli y S. aureus se cultivaron durante 18 horas en varios medios sólidos. También se logró una identificación confiable cuando los hongos se cultivaron en medios sólidos y líquidos (caldo Sabouraud). Además,
el crecimiento de los hongos en caldo resultó en una identificación acelerada. La espectrometría de masas MALDI-TOF también permitió una identificación confiable de microorganismos a partir de muestras de hemocultivo positivas. En total, se examinaron 2.900 muestras (234 especies diferentes) derivadas predominantemente de muestras clínicas. Los microorganismos se cultivaron en medios sólidos, en frascos de hemocultivo y en caldo líquido Sabouraud. El 98,6% (n = 2.860) de los resultados de identificación MALDI-TOF coincidieron con los de los métodos convencionales (p. ej., tinción de Gram, capacidad de degradación de carbohidratos, sistema Phoenix) y la secuenciación del producto de PCR del 16S rDNA. Las discordancias se basaron principalmente en espectros de referencia faltantes en la base de datos del sistema de análisis. El estudio se realizó en 2009. Debido a la mejora continua de la base de datos, se lograría una precisión aún mayor al realizar el estudio en la actualidad. En resumen, el uso de la espectrometría de masas MALDI-TOF en un entorno clínico de alto rendimiento conduce a resultados confiables, incluso cuando se utilizan varias condiciones de cultivo, por ejemplo, caldos para el cultivo de hongos. La espectrometría de masas MALDI-TOF es un sistema de identificación rápido y robusto, que está camino de convertirse en un nuevo estándar para la identificación de microorganismos en laboratorios de alto rendimiento.