diario de hígado

Abstracto

Generación exitosa de partículas pseudotipo del virus de la hepatitis B (VHB); una herramienta versátil para la identificación del receptor del VHB y la investigación de la infectividad del VHB

Keiji Ueda y Hiroko Omori

Hace casi medio siglo que se identificó el virus de la hepatitis B (VHB). Las moléculas receptoras del VHB y el mecanismo de entrada del VHB en los hepatocitos no se han dilucidado por completo, aunque existen algunos informes sobre los sistemas de infección y sobre las moléculas receptoras. Por lo tanto, aún no hemos logrado encontrar un receptor real del VHB y no ha habido ningún sistema de infección útil y conveniente in vitro e in vivo para el VHB, lo que nos hace imposible comprender un ciclo de vida preciso del VHB y las enfermedades relacionadas con el VHB involucradas. Realmente se necesita un sistema de infección del VHB para explorar formas y medios de tratamiento de las enfermedades relacionadas con el VHB también en base a la evidencia. Aquí, diseñamos e intentamos generar un pseudotipo del VHB, que tiene una partícula viral que contiene una cápside de retrovirus y un genoma en su interior rodeado por proteínas de membrana del VHB. Probamos la generación exitosa de este pseudotipo mediante inmunoprecipitación con anticuerpos anti-VHB y mediante ultracentrifugación en gradiente de densidad de CsCl, seguida de RT-PCR dirigida a un gen retroviral, un gen EGFP en este caso, respectivamente. Aunque nuestro sistema establecido está construido sobre la integración dependiente del crecimiento de genomas retrovirales y, por lo tanto, fue muy difícil observar su infección en un sistema de cultivo primario de hepatocitos humanos, la generación exitosa del pseudotipo de VHB nos permitirá realizar un ensayo biológico para clonar un receptor de VHB en función de la infectividad y facilitará su separación e identificación.