Revista de Patología Vegetal y Microbiología

Abstracto

La unión de la proteína quinasa dependiente de Ca2+ al supresor del patógeno del tizón tardío de la papa, demostrada por espectroscopia de correlación de fluorescencia (FCS), inhibe la NADPH oxidasa y la generación de oxígeno activo en células de papa

Naotaka Furuichi, Masatoshi Ohta, Hisakazu Okamura, Tuneyoshi Horigome y Kazutoshi Yokokawa

Se informó que el glucano de Phytophthora infestans (Pi), que representa el supresor de la muerte celular por hipersensibilidad de las células vegetales, inhibe la acumulación de fitoalexina y la muerte celular por hipersensibilidad. Para evaluar la activación de la proteína quinasa dependiente de calcio (CDPK) después de la unión del supresor de Pi, se aplicó la espectroscopia de correlación de fluorescencia (FCS) a un supresor marcado con GFP-CDPK y Alexa. Construimos una proteína quimérica, fusionamos en tándem la FP verde (GFP)-CDPK y el supresor con los anticuerpos supresores marcados con Alexa 633 (Abs). La FCS de dos colores proporciona información sobre la coincidencia de dos moléculas fluorescentes espectralmente a nivel de molécula única. En este trabajo se informa que, para la inhibición de la NADPH oxidasa de la patata, el supresor unido al péptido CDPK (péptidos de los dominios quinasa I y III), la CDPK fosforiló la NADPH oxidasa en un ensayo de quinasa en gel, y que la generación de oxígeno activo por la NADPH oxidasa fue inhibida por el supresor. Esto significa que el supresor inhibidor de HR del patógeno vegetal controla la formación de radicales superóxido en la célula vegetal mediante la señal de la fosforilación por una CDPK.