Revista de Patología Vegetal y Microbiología

Abstracto

Comparación de anticuerpos generados contra PLRV con dos enfoques diferentes: purificación de partículas virales y producción recombinante de CP

Aseel DG y Hafez EE

La serología es una de las técnicas más importantes que se utiliza ampliamente en diferentes campos, especialmente en el de la agricultura. Los métodos serológicos que se utilizan generalmente debido a su especificidad en el diagnóstico de enfermedades y a su relativa facilidad de realización. Los métodos que se utilizan ampliamente en la virología de las plantas incluyen el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas, el inmunoensayo dot-blot, la microscopía electrónica inmunoespecífica y el inmunoensayo tissue-blot. La piedra angular de la prueba serológica es el antisuero, que puede ser mono o poli. Debido al alto coste de la producción de monoantisueros y a su baja sensibilidad de los inmunizados por las partículas virales purificadas, la proteína recombinante podría ser una buena sustitución. En este estudio, nos propusimos producir polisueros utilizando las partículas virales y también con la proteína de la cubierta recombinante del virus del enrollamiento de la hoja de la patata y utilizar ambos en la inmunización de conejos por separado. La sensibilidad, especificidad y reactividad de los dos sueros producidos se probaron comparándolos con la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real. Los resultados revelaron que los polisueros producidos por la proteína de la cubierta recombinante son más específicos y sensibles que los sueros producidos por las partículas purificadas. Además, los resultados obtenidos por punto y transferencia tisular confirmaron los resultados obtenidos por técnicas de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas. Los resultados de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real fueron similares a los obtenidos por métodos serológicos, excepto el tiempo y el sustrato. En conclusión, la producción de polisueros utilizando proteína recombinante es una prueba fácil, económica y sensible para la detección en línea de viales.