Genética hereditaria: investigación actual

Abstracto

El uso de la genotipificación por PCR en tiempo real para detectar mutaciones activadoras de GNAS en el síndrome de McCune-Albright

Mariani BMP, Trarbach EB, Toledo RA, Lerario AM, Latronico AC, Mendonca BB y Fragoso MCBV

Introducción: El síndrome de McCune-Albright (MAS) es una enfermedad genética que se caracteriza clínicamente por la tríada: displasia fibrosa ósea, manchas cutáneas café con leche e hiperfunción endocrina, como pubertad precoz. El MAS se debe a mutaciones activadoras de GNAS, el gen que codifica Gs alfa y el análisis de mutaciones de este gen podría aumentar el diagnóstico definitivo de MAS y atípico y parcial. Objetivos: Identificar las mutaciones activadoras de GNAS p.R201H y p. R201C en múltiples tejidos derivados de pacientes con MAS mediante genotipado por PCR en tiempo real. Material y métodos: Se aisló ADN genómico de sangre de 31 pacientes (28 mujeres) con formas típicas y atípicas de MAS. También se dispuso de muestras de piel, glándula suprarrenal u tejido óseo de seis pacientes diferentes. Se realizó genotipado basado en ensayo de PCR en tiempo real utilizando sondas TaqMan para la identificación de mutaciones de GNAS p.R201H y p. R201C. Se utilizaron técnicas de clonación y secuenciación como asentimiento. Resultados: Utilizando la genotipificación por PCR en tiempo real, no se identificaron mutaciones en GNAS en muestras de sangre de pacientes con MAS, solo en la muestra ósea de un paciente con un p.R201H previamente identificado. La clonación y secuenciación de la sangre de este mismo paciente reveló que 5/150 clones albergaban el p. R201H. Conclusión: La genotipificación por PCR en tiempo real demostró ser eficiente para el diagnóstico molecular de MAS en los tejidos de pacientes afectados. Las ventajas de esta técnica son la rapidez, la precisión, es generalmente fácil de realizar y podría usarse de manera rutinaria. Sin embargo, la optimización de la detección de mutaciones GNAS aún es necesaria para considerar esta técnica para el diagnóstico temprano de formas no clásicas de MAS utilizando sangre periférica.