Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Clones de células madre pluripotentes TRA-1-60+, SSEA-4+, POU5F1+, SOX2+ y NANOG+ en carcinomas embrionarios de testículos

Marek Malecki, Xenia Tombokan, Mark Anderson, Raf Malecki y Michael Beauchaine

Introducción: El cáncer de testículo es actualmente la neoplasia más frecuente y una de las principales causas de morbilidad en hombres de 15 a 35 años de edad. Su incidencia está aumentando. El carcinoma embrionario es su forma más maligna, que puede ser resistente o desarrollar resistencia a las terapias, lo que resulta en recaídas. Se plantea la hipótesis de que las células madre cancerosas son las impulsoras de estos fenómenos. Objetivo específico: El objetivo específico de este trabajo fue la identificación y el aislamiento de espectros de células madre cancerosas individuales y vivas, que se adquirieron directamente de las biopsias de los pacientes, seguido de la prueba de su pluripotencia. Pacientes-métodos: Se obtuvieron biopsias de los pacientes con los diagnósticos clínicos e histológicos de los carcinomas embrionarios primarios puros de los testículos. Los anticuerpos dirigidos a TRA-1-60 y SSEA-4 se bioingenierizaron para hacerlos magnéticos o fluorescentes. La expresión superficial de TRA-1-60 y SSEA-4 se analizó mediante espectroscopia de fluorescencia multifotónica (MPFS), citometría de flujo (FCM), inmunotransferencia (IB), espectroscopia de resonancia magnética nuclear (NMRS) y espectroscopia de rayos X de reflexión total (TRXFS). Las células vivas individuales se aislaron mediante clasificación magnética o fluorescente seguida de su expansión clonal. Las transcripciones de los genes OCT4A, SOX2 y NANOG se analizaron mediante qRTPCR y los productos mediante IB y MPFS. Resultados: Los clones de células con una fuerte expresión superficial de TRA-1-60 y SSEA-4 se identificaron y aislaron directamente de las biopsias adquiridas de los pacientes diagnosticados con carcinomas embrionarios puros de los testículos. Estas células demostraron altos niveles de transcripción y traducción de los genes de pluripotencia: OCT4A, SOX2 y NANOG. Formaron cuerpos embrionarios, que se diferenciaron en ectodermo, mesodermo y endodermo. Conclusión: En los carcinomas embrionarios puros de testículo, adquiridos directamente de los pacientes, identificamos, aislamos con alta viabilidad y selectividad y perfilamos los clones de células madre pluripotentes. Estos resultados pueden ayudar a explicar la resistencia a la terapia y las recaídas de estas neoplasias, así como a diseñar terapias dirigidas y personalizadas.