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Abstracto
La inmunidad entrenada en monocitos de pacientes ateroscleróticos se asocia con un aumento de la actividad mitocondrial y del nivel de colesterol intracelular
Nikita G Nikiforov
La activación de los monocitos circulantes podría ser responsable de la formación de la inflamación crónica en la pared arterial. Evaluamos la capacidad de activación de los monocitos circulantes aislados de la sangre de pacientes ateroscleróticos y tratamos de encontrar los factores responsables.
El estudio involucró a donantes sanos (N=36) y pacientes con aterosclerosis subclínica (N=40) diagnosticada mediante medición ultrasonográfica del espesor de la íntima-media de las arterias carótidas comunes (cIMT). Los monocitos se aislaron mediante separación magnética de CD14+ y se incubaron con 1 ug/ml de LPS durante 24 h, seguido de la medición de la secreción de TNF mediante ELISA. Paralelamente, se evaluó el nivel de colesterol intracelular de los monocitos circulantes utilizando el kit AmplexRedCholesterol. Los monocitos también se incubaron con 100 ug/ml de ácido 5-aminolevulínico durante 4 h para inducir la acumulación de protoporfirina IX (PpIX). La fluorescencia de PpIX y el colorante Mitotracker dependiente del potencial se visualizaron mediante microscopía confocal y se analizaron con el software ilastic.
La secreción de TNF aumentó significativamente en los monocitos estimulados con LPS aislados de la sangre de pacientes ateroscleróticos en comparación con los participantes sanos. Se observaron fuertes correlaciones entre la secreción de TNF y el nivel de colesterol total intracelular con cIMT, lo que indica que los monocitos de pacientes ateroscleróticos tienen un estado inflamatorio aumentado, así como un mayor contenido de colesterol total. Sorprendentemente, la secreción de TNF por células estimuladas con LPS y cIMT tuvo una correlación significativa con la relación monocitos Mitotracker/PpIX, lo que indica que los monocitos entrenados de pacientes ateroscleróticos se caracterizan por una mayor actividad mitocondrial.
Hemos demostrado que los monocitos inmunológicamente entrenados que circulan en pacientes ateroscleróticos con cIMT aumentado se caracterizan por un mayor nivel de colesterol total intracelular y actividad mitocondrial.
Con apoyo de RSF (subvención n.º 20-65-46021).