Revista de bioequivalencia y biodisponibilidad

Abstracto

Cuantificación de fenspirida en plasma humano mediante UPLC-MS/MS

Yuriy V Pidpruzhnykov, Valerii E Sabko, Volodymyr V Iurchenko e Igor A Zupanets

Se ha desarrollado y validado un nuevo método simple y rápido de cromatografía líquida de ultra rendimiento - espectrometría de masas en tándem (UPLC-MS/MS) para la cuantificación de fenspirida en plasma humano. Después de una simple precipitación de proteínas con acetonitrilo, el analito y el estándar interno (bupivacaína) se separaron en una columna ACQUITY UPLC ® BEH С18 (50 mm × 2,1 mm, 1,7 μm) utilizando una mezcla de gradiente de acetonitrilo y agua (ambos conteniendo 0,2% de ácido fórmico) como fase móvil a una velocidad de flujo de 0,4 mL/min. El tiempo de retención de fenspirida y bupivacaína fue de 0,64 y 0,87 min, respectivamente. La detección se realizó en modo positivo monitoreando las transiciones de m/z 261→105 para fenspirida y m/z 289→140 para bupivacaína. El límite inferior de cuantificación fue de 2 ng/mL utilizando alícuotas de plasma de 200 μL. El rango de cuantificación de fenspirida fue de 2-500 ng/mL. La precisión del análisis intraensayo y entre ensayos fue <9,5%, la exactitud varió de 91,5% a 112,4%, la recuperación promedio de 99,3% a 101,9%. El analito fue estable en plasma humano después de tres ciclos de congelación/descongelación y durante 5 meses después del almacenamiento a -70°C. El método se aplicó con éxito al estudio de bioequivalencia de comprimidos recubiertos genéricos y de marca de fenspirida.