Revista de carcinogénesis y mutagénesis

Abstracto

Los miRNA let-7a basados ​​en vectores funcionan como supresores de múltiples oncogenes en células de neuroblastoma SK-N-MC y SHEP

Guan J, Guo S, Zeng X, Luo Y, Yang T y Cao J

Objetivo: Este estudio fue diseñado para determinar el efecto antitumoral del miRNA let-7a basado en vector en líneas celulares de neuroblastoma.
Métodos: Se construyó un vector de expresión let-7a inducible por tetraciclina (tet) y se utilizó para transfectar de forma estable células de neuroblastoma SKN-MC y SHEP. Los efectos de la sobreexpresión de let-7a inducida por tetraciclina sobre la proliferación y adhesión celular se analizaron in vitro mediante ensayos MTT y ensayos de adhesión. La expresión de ARNm de los oncogenes diana de let-7 NRAS, KRAS, c-myc y HMGA2 se examinó mediante reacción en cadena de polimerasa con transcripción inversa cuantitativa en tiempo real. La expresión proteica de N-RAS, K-RAS, c-Myc, HMGA2, NeuN y β3-tubulina se analizó mediante transferencia Western e inmunocitoquímica. También se observó la morfología de las células SK-N-MC y SHEP. Además, las células SHEP transfectadas con el vector inducible let-7a se inyectaron por vía subcutánea en ratones desnudos y también se evaluó el crecimiento tumoral in vivo.
Resultados: La expresión de Let-7a se indujo significativamente en células de neuroblastoma e inhibió la proliferación y adhesión celular tanto en células SK-N-MC como SHEP. Let-7a reguló positivamente la expresión de β3-tubulina y NeuN en células SK-N-MC y SHEP. Sin embargo, se observó un crecimiento corto similar a neuritas solo en células SK-N-MC, pero no en células SHEP. La sobreexpresión de Let-7a disminuyó la expresión de las proteínas N-RAS y HMGA2 tanto en células SK-N-MC como SHEP. La expresión de c-Myc también disminuyó en células SK-N-MC. Los tamaños tumorales de los xenoinjertos SHEP en el grupo inducible con tet fueron más pequeños que los de los ratones sin inducción con tetraciclina.
Conclusión: En conjunto, nuestros datos demuestran los efectos antitumorales de la sobreexpresión del microARN let-7a basado en vectores en células de neuroblastoma SK-N-MC y SHEP contra multioncogenes. El microARN let-7a es una molécula terapéutica potencial para el tratamiento del neuroblastoma.