Revista de Farmacología Clínica y Experimental

Abstracto

La verticilina A inhibe el crecimiento de leiomiosarcomas y tumores malignos de la vaina nerviosa periférica mediante la inducción de la apoptosis

Zewdu A, López G, Braggio D, Kenny C, Constantino D, Bid HK, Batte K, Iwenofu OH, Oberlies NH, Pearce CJ, Strohecker AM, Lev D, Pollock RE *

Objetivo: La heterogeneidad del sarcoma de tejidos blandos (STS) representa un desafío importante para el desarrollo de terapias efectivas. Los subconjuntos de STS, compuestos por más de 50 subtipos histológicos diferentes de diversas etiologías, se caracterizan además como cariotípicamente simples o complejos. Debido a la cantidad de anomalías genéticas asociadas con los STS genéticamente complejos, el desarrollo de terapias que demuestren potencia contra este grupo de STS es especialmente desafiante y, sin embargo, muy necesario. La verticilina A es un producto natural de molécula pequeña con actividad anticancerígena demostrada; sin embargo, la eficacia de este agente nunca se ha evaluado en STS. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue explorar la verticilina A como un posible tratamiento terapéutico para STS.

Métodos: Realizamos análisis de supervivencia (MTS) y clonogénicos para medir el impacto de este agente en la viabilidad y la capacidad de formación de colonias de líneas celulares STS cariotípicamente complejas: tumor maligno de la vaina del nervio periférico (MPNST) y leiomiosarcoma (LMS). Los efectos in vitro de la verticilina A en la apoptosis se investigaron mediante análisis de citometría de flujo de anexina V/PI y midiendo la actividad de la caspasa 3/7 escindida marcada con fluorescencia. El impacto en la progresión del ciclo celular se evaluó mediante la medición citométrica de la intercalación de yoduro de propidio. Los estudios in vivo se realizaron utilizando modelos de xenoinjerto MPNST. Los tumores se procesaron y analizaron mediante inmunohistoquímica (IHC) para los efectos de la verticilina A en el crecimiento (Ki67) y la apoptosis (caspasa 3 escindida).

Resultados: El tratamiento con verticilina A resultó en una disminución del crecimiento de STS y un aumento en los niveles apoptóticos después de 24 h. 100 nM de verticilina A indujo una abrogación significativa del crecimiento celular después de 24 h (reducción del 96,7, 88,7, 72,7, 57 y 39,7 % en LMS1, S462, ST88, SKLMS1 y MPNST724, respectivamente). No observamos detención del ciclo celular, anexina elevada y un aumento de casi el doble en la actividad de la caspasa 3/7 escindida en todas las líneas celulares MPNST y LMS. Las células de control normales de Schwann humano (HSC) y de músculo liso aórtico (HASMC) mostraron una mayor tolerancia al tratamiento con verticilina A en comparación con las líneas celulares de sarcoma, aunque se observó toxicidad en HSC a la dosis de tratamiento más alta. Los estudios in vivo reflejaron los resultados in vitro: para el día 11, el tamaño del tumor se redujo significativamente en los modelos de xenoinjerto MPNST724 con tratamiento de 0,25 y 0,5 mg/kg de verticilina A. Además, la evaluación IHC de los tumores demostró un aumento de la caspasa 3 escindida y una disminución de la proliferación (Ki67) después del tratamiento con verticilina A.

Conclusión: El avance en el tratamiento de los STS cariotípicamente complejos se ve obstaculizado por el alto nivel de anomalías genéticas que se encuentran en estas enfermedades. En consecuencia, es muy necesaria la identificación e investigación de nuevas terapias. Nuestros datos sugieren que la verticilina A inhibe selectivamente el crecimiento de MPNST y LMS a través de la inducción de la apoptosis, al tiempo que exhibe efectos mínimos a moderados en las células normales, lo que indica que la verticilina A es un posible tratamiento para MPNST y LMS, después de una validación preclínica adicional.