Tecnología de fermentación

Abstracto

Producción, purificación y caracterización parcial de la proteasa tolerante a los organosolventes de la bacteria Bacillus sp. BBXS-2 recientemente aislada

Abdul Sattar Qureshi, Altaf Ahmed Simair, Chaudhry Haider Ali, Imrana Khushk, Jawaid Ahmed Khokhar, Ayyaz Ahmad, Muhammad Danish, Changrui Lu

Las enzimas proteolíticas se aplican en diversas industrias, como la de detergentes, cuero, alimentos, textiles, cosméticos, productos farmacéuticos y biotecnología sintética. Para satisfacer las necesidades comerciales, se han centrado en cepas microbianas de alto valor en términos de producción rentable. En este estudio, la cepa termófila, Bacillus sp. BBXS-2, se activó en un medio de crecimiento simple y luego se transfirió a un medio Luria Bertani (LB). La concentración máxima de proteasa fue de 6723 U/mL en condiciones de fermentación optimizadas (melaza, licor de maceración de maíz, pH 9,0 y 45 °C). Los resultados mostraron que no se observaron diferencias en el crecimiento bacteriano y el título de proteasa al reemplazar el extracto de levadura con licor de maceración de maíz, por lo que, de esta manera, se puede ahorrar aproximadamente el 90 % del costo de la fuente de nitrógeno. La enzima extracelular se purificó hasta homogeneidad a partir de sobrenadante libre de células mediante precipitación con sulfato de amonio seguida de diálisis y cromatografía de intercambio iónico; el rendimiento de recuperación se redujo del 100 al 22 % y el factor de purificación aumentó de 1 a 9,82. La enzima fue activa en un amplio rango de pH y temperatura de 8-12 pH y 30-60 °C, con una actividad máxima a pH 10,0 y 60 °C, respectivamente. La proteasa retuvo más del 90 % de actividad después de la incubación a 40 °C durante 2 semanas en presencia de solventes orgánicos (40 % v/v), incluidos etanol, metanol e isopropanol. En general, la investigación sugiere que esta cepa es un candidato más prometedor y posee la capacidad práctica de usarse en las industrias.