Revista de tecnología y procesamiento de alimentos

Abstracto

Extracción y purificación de quimotripsina del intestino de la perca roja (Sebastes marinus) mediante micelas inversas: optimización del paso de extracción directa

Liang Zhou, Suzanne M. Budge, Abdel E. Ghaly, Marianne S. Brooks y Deepika Dave

Los desechos del procesamiento de pescado se pueden utilizar para producir subproductos valiosos, como la quimotripsina, que tiene aplicaciones en las industrias alimentaria, del cuero, química y clínica. La quimotripsina es una endopeptidasa secretada por los tejidos pancreáticos de vertebrados e invertebrados. Se utilizaron sistemas de micelas inversas (RM) que consisten en AOT/isooctano para la purificación de quimotripsina a partir de un extracto acuoso crudo de intestino de perca roja. Se estudiaron los efectos del pH y la concentración de AOT en el paso de extracción directa sobre el volumen total (TV), la relación de volumen (VR), la concentración de proteína (Cp), la actividad enzimática (AE), la actividad total (TA), la actividad específica (SA), el pliegue de purificación (PF) y el rendimiento de recuperación (RY). El TV disminuyó con los aumentos en la concentración de AOT y las disminuciones del pH. El VR disminuyó ligeramente con los aumentos en el pH, pero no se vio afectado por la concentración de AOT. El AE, Cp, SA, PF y RY más altos se lograron con un pH de 7,0 y una concentración de AOT de 20 mM. Una mayor cantidad de surfactante formó una estructura de mezcla de aceite-agua estable y causó dificultades en el paso de extracción hacia atrás. Cuando el pH se incrementó de 6,0 a 7,0 y/o la concentración de AOT se incrementó de 1 a 20 mM, el AE, Cp, SA y RY aumentaron inicialmente y luego disminuyeron con aumentos adicionales en el pH y/o la concentración de AOT. Los aumentos en estos parámetros se debieron a la mayor interacción electrostática entre la carga neta en la superficie de la molécula de proteína y la carga de la capa interna de las micelas inversas causada por el aumento del pH y la mayor estructura de las micelas inversas causada por el aumento de la concentración de AOT. Las disminuciones en estos parámetros se debieron a la disminución de la carga neta en las moléculas de proteína que debilitó la interacción electrostática entre la quimotripsina y las micelas inversas. El AE, TA, SA, PF y RY obtenidos con el método RM fueron mayores que los obtenidos con el método de sulfato de amonio (AS) en 2,16-2,82 veces.