Lisha Zhao, Suzanne M. Budge, Abdel E. Ghaly, Marianne S. Brooks y Deepika Dave
La pepsina, una proteasa ácida importante, se sintetiza y secreta en la membrana gástrica en un estado inactivo llamado pepsinógeno (PG) y tiene aplicaciones en las industrias alimentaria y manufacturera, en la extracción de colágeno, la extracción de gelatina y en la regulación de la digestibilidad. Los desechos del procesamiento del pescado se pueden utilizar para producir subproductos comercialmente valiosos, como el pepsinógeno. En el presente estudio, se optimizó la purificación del pepsinógeno del estómago de la perca roja utilizando sistemas acuosos de dos fases (ATPS) formados por polietilenglicol (PEG) y sal a 4 °C. Se estudiaron los efectos del tipo de sal (MgSO 4 , (NH 4 ) 2 SO 4 , Na 3 C 6 H 5 O 7 y K 2 HPO 4 ) y la concentración (6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 15, 17, 19%) en la partición de PG y se evaluaron parámetros como el volumen total (TV), la relación de volumen (VR), la actividad enzimática (AE), el contenido de proteína (Cp), la actividad específica (SA), el coeficiente de partición (Kp), el pliegue de purificación (PF) y el rendimiento de recuperación (RY). El tipo de sal y la concentración de sal tuvieron efectos significativos en cada parámetro. MgSO 4 , (NH 4 ) 2 SO 4 , Na 3 C 6 H 5 O 7 y K 2 HPO 4 requirieron diferentes concentraciones críticas de sal (9, 12, 12 y 10%, respectivamente) para formar sistemas bifásicos. TV y VR disminuyeron con el aumento de la concentración de sal ya que la sal formó enlaces de hidrógeno con las moléculas de agua y creó una estructura de agua más compacta y ordenada. AE, CP, SA, PF y RY mostraron un aumento máximo con una concentración de sal intermedia, mientras que KP tuvo el patrón opuesto. Los valores más altos de TV y AE se obtuvieron al 12% de (NH 4 ) 2 SO 4 mientras que los valores más altos de SA y PF se obtuvieron al 12% de MgSO 4 . Los valores más altos de TV y Cp se obtuvieron al 12 y 15% de Na 3 C 6 H 5 O 7 , respectivamente. (NH 4 ) 2 SO 4 al 15% de concentración dio el RY más alto (71,7%) y fue seleccionado como el tipo de sal y concentración óptimos. Por lo tanto, 15% (NH 4 ) 2 SO 4 18% PEG 1500 fue la combinación óptima de ATPS y presentó la mejor partición. Los valores de SA, PF y RY obtenidos con el método ATPS fueron dos veces superiores a los obtenidos con el método de fraccionamiento de sulfato de amonio (ASF).