Revista de tecnología y procesamiento de alimentos

Abstracto

Eliminación selectiva de impurezas de fenilalanina del glicomacropéptido de κ-caseína comercial mediante cromatografía de intercambio aniónico

Nakano T y Ozimek L

El glicomacropéptido de κ-caseína bovina (GMP) que se encuentra en el suero dulce es un glicopéptido fosforilado de 64 residuos de aminoácidos. Debido a que carece de aminoácidos aromáticos, incluida la fenilalanina, se cree que el GMP es una fuente dietética importante de aminoácidos para los pacientes que sufren de fenilcetonuria. Sin embargo, hay muy poca información disponible sobre la preparación de GMP sin fenilalanina para el consumo humano. Por lo tanto, este estudio se realizó para eliminar las impurezas que contienen fenilalanina del GMP crudo disponible comercialmente mediante cromatografía de intercambio aniónico en dietilaminoetil (DEAE)-Sephacel. Los resultados demostraron que las proteínas o péptidos que contienen fenilalanina no se unen a la columna, mientras que la mayoría del GMP que representa el 93% del ácido siálico recuperado total puede unirse a la columna. El GMP purificado, que representaba un promedio del 43% del peso seco del GMP crudo, contenía un nivel indetectable de fenilalanina. Los análisis y la electroforesis en acetato de celulosa mostraron que el GMP purificado es un producto con un alto contenido de ácido siálico (promedio de 15,5 % de peso seco). La cromatografía de filtración en gel en Sephacryl S-100 y la HPLC de exclusión por tamaño en Superdex 75 confirmaron nuestros hallazgos anteriores de que los monómeros de GMP forman agregados y eluyen como un único pico con un volumen de elución cercano al volumen de elución de la β-lactoglobulina dimérica (36,6 kDa). Se concluyó que la preparación cruda de GMP se puede refinar en gran medida eliminando selectivamente las impurezas de fenilalanina utilizando cromatografía DEAE-Sephacel.